Evidence of SARS-CoV-2 infection in postmortem lung, kidney, and liver samples, revealing cellular targets involved in COVID-19 pathogenesis.

There is an urgent need to understand severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2)-host interactions involved in virus spread and pathogenesis, which might contribute to the identification of new therapeutic targets. In this study, we investigated the presence of SARS-CoV-2 in postmortem lung, kidney, and liver samples of patients who died with coronavirus disease (COVID-19) and its relationship with host factors involved in virus spread and pathogenesis, using microscopy-based methods. The cases analyzed showed advanced stages of diffuse acute alveolar damage and fibrosis. We identified the SARS-CoV-2 nucleocapsid (NC) in a variety of cells, colocalizing with mitochondrial proteins, lipid droplets (LDs), and key host proteins that have been implicated in inflammation, tissue repair, and the SARS-CoV-2 life cycle (vimentin, NLRP3, fibronectin, LC3B, DDX3X, and PPARγ), pointing to vimentin and LDs as platforms involved not only in the viral life cycle but also in inflammation and pathogenesis. SARS-CoV-2 isolated from a patient´s nasal swab was grown in cell culture and used to infect hamsters. Target cells identified in human tissue samples included lung epithelial and endothelial cells; lipogenic fibroblast-like cells (FLCs) showing features of lipofibroblasts such as activated PPARγ signaling and LDs; lung FLCs expressing fibronectin and vimentin and macrophages, both with evidence of NLRP3- and IL1ß-induced responses; regulatory cells expressing immune-checkpoint proteins involved in lung repair responses and contributing to inflammatory responses in the lung; CD34+ liver endothelial cells and hepatocytes expressing vimentin; renal interstitial cells; and the juxtaglomerular apparatus. This suggests that SARS-CoV-2 may directly interfere with critical lung, renal, and liver functions involved in COVID-19-pathogenesis.

Efectos del ácido fólico sobre algunas variables morfométricas del timo de ratas adolescentes con síndrome fetal alcohólico / Effects of folic acid on some morphometric variables of the thymus of adolescent rats with fetal alcohol syndrome

Se pretende determinar los efectos protectores sobre el timo de ratas adolescente con síndrome fetal alcohólico experimental, para lo cual se utilizaron 24 ratas Wistar adolescentes y gestantes divididas en 4 grupos: A) tratadas con etanol, B) tratadas con etanol y ácido fólico, C) tratadas solo con ácido fólico y D) grupo no tratado. El tratamiento se extendió durante toda la gestación hasta el parto. Se tomaron 2 crías por cada madre. A las crías se les practicó la eutanasia a los 35 días de vida posnatal. Se extrajo el timo y se obtuvieron cortes de 4 micrómetros y se colorearon con H/E. Se utilizó el programa digital para morfometría Image Tool. Se midieron las áreas de la corteza y médula del timo, así como la relación entre ambas variables. Se realizó ANOVA de 2 vías. El área de la corteza del timo fue significativamente menor en el grupo tratado con etanol en relación con el resto de los grupos. Los hijos de las madres tratadas con ácido fólico mostraron los valores mayores en el área de la corteza, y el grupo tratado con etanol y ácido fólico mostró un patrón muy similar al control. Se concluyó que el etanol provoca cambios histopatológicos evaluados como atrofia de la corteza del timo y que el ácido fólico suministrado a la madre durante la gestación tiene efecto protector sobre esta anomalía

The study is intended to determine the protective effects of folic acid on the thymus of adolescent rats with experimental fetal alcohol syndrome. To this end, 24 adolescent and pregnant Wistar rats were used, which were divided in 4 groups: A) treated with ethanol, B) treated with ethanol and folic acid, C) treated only with folic acid, and D) not treated. Treatment extended throughout the entire gestation period until delivery. Two offspring were chosen from each mother. The offspring were euthanized at 35 days of postnatal life. The thymus was extracted and 4-micrometer cutouts were obtained, which were colored with H/E. The digital program Image Tool was used for morphometry. Measurements were taken of areas of the thymic cortex and medulla, and the relationship between the two variables was determined. A two-way ANOVA was performed. The thymic cortex area was significantly smaller in the group treated with ethanol than in the other groups. Offspring of mothers treated with folic acid showed the highest cortex area values, and the group treated with ethanol and folic acid exhibited a pattern very similar to the control group. It was concluded that ethanol brings about histopathological changes evaluated as thymic cortex atrophy, and that the folic acid administered to mothers during gestation has a protective effect over this abnormality

Efectos del ácido fólico sobre algunas variables morfométricas del timo de ratas adolescentes con síndrome fetal alcohólico / Effects of folic acid on some morphometric variables of the thymus of adolescent rats with fetal alcohol syndrome

Se pretende determinar los efectos protectores sobre el timo de ratas adolescente con síndrome fetal alcohólico experimental, para lo cual se utilizaron 24 ratas Wistar adolescentes y gestantes divididas en 4 grupos: A) tratadas con etanol, B) tratadas con etanol y ácido fólico, C) tratadas solo con ácido fólico y D) grupo no tratado. El tratamiento se extendió durante toda la gestación hasta el parto. Se tomaron 2 crías por cada madre. A las crías se les practicó la eutanasia a los 35 días de vida posnatal. Se extrajo el timo y se obtuvieron cortes de 4 micrómetros y se colorearon con H/E. Se utilizó el programa digital para morfometría Image Tool. Se midieron las áreas de la corteza y médula del timo, así como la relación entre ambas variables. Se realizó ANOVA de 2 vías. El área de la corteza del timo fue significativamente menor en el grupo tratado con etanol en relación con el resto de los grupos. Los hijos de las madres tratadas con ácido fólico mostraron los valores mayores en el área de la corteza, y el grupo tratado con etanol y ácido fólico mostró un patrón muy similar al control. Se concluyó que el etanol provoca cambios histopatológicos evaluados como atrofia de la corteza del timo y que el ácido fólico suministrado a la madre durante la gestación tiene efecto protector sobre esta anomalía(AU)

The study is intended to determine the protective effects of folic acid on the thymus of adolescent rats with experimental fetal alcohol syndrome. To this end, 24 adolescent and pregnant Wistar rats were used, which were divided in 4 groups: A) treated with ethanol, B) treated with ethanol and folic acid, C) treated only with folic acid, and D) not treated. Treatment extended throughout the entire gestation period until delivery. Two offspring were chosen from each mother. The offspring were euthanized at 35 days of postnatal life. The thymus was extracted and 4-micrometer cutouts were obtained, which were colored with H/E. The digital program Image Tool was used for morphometry. Measurements were taken of areas of the thymic cortex and medulla, and the relationship between the two variables was determined. A two-way ANOVA was performed. The thymic cortex area was significantly smaller in the group treated with ethanol than in the other groups. Offspring of mothers treated with folic acid showed the highest cortex area values, and the group treated with ethanol and folic acid exhibited a pattern very similar to the control group. It was concluded that ethanol brings about histopathological changes evaluated as thymic cortex atrophy, and that the folic acid administered to mothers during gestation has a protective effect over this abnormality(AU)

HCV core protein localizes in the nuclei of nonparenchymal liver cells from chronically HCV-infected patients.

Understanding the mechanism of hepatitis C virus (HCV) pathogenesis is an important part of HCV research. Recent experimental evidence suggests that the HCV core protein (HCcAg) has numerous functional activities. These properties suggest that HCcAg, in concert with cellular factors, may contribute to pathogenesis during persistent HCV infection. HCV is capable of infecting cells other than hepatocytes. Although the extrahepatic cellular tropism of HCV may play a role in the pathophysiology of this infection, the precise biological significance of the presence of HCV components in different liver cell types presently remains to be established. In this study, HCcAg was detected in nonparenchymal liver cells of six patients out of eight positive for serum HCV RNA. Immunostaining with anti-HCcAg mAbs revealed the presence of this protein in different liver cell types such as lymphocytes, Kupffer, polymorphonuclear, pit, endothelial, stellate, and fibroblast-like cells. Interestingly, HCcAg was immunolabeled not only in the cytoplasm but also in the nucleus of these cells. Remarkably, HCcAg co-localized with large lipid droplets present in stellate cells and with collagen fibers in the extracellular matrix. Moreover, HCcAg was immunolabeled in bile canaliculus suggesting the involvement of the biliary system in the pathobiology of HCV. Data suggest that nonparenchymal liver cells may constitute a reservoir for HCV replication. Besides, HCcAg may contribute to modulate immune function and fibrosis in the liver as well as steatosis.

Alteraciones morfométricas de los hepatocitos de ratas albinas que ingieren alcohol desde la adolescencia / Morphometric alterations of the hepatocytes of albinic rats ingesting alcohol since adolescence

Se estudió el hígado, se midieron las variables: área núcleo, área citoplasma, y relación núcleo citoplasma de los hepatocitos de las zonas periportal, intermedia y perivenosa. Se utilizaron 40 ratas de uno y otro sexos, conformándose 2 grupos: alcohólicas y controles. A las alcohólicas se le suministró etanol 40 por ciento diluido en agua desde los 28 hasta los 90 d de nacidas, por vía oral y mediante una cánula intraesofágica. Las variables morfométricas área núcleo y la relación núcleo citoplasma resultaron estadísticamente diferentes y mayores en las ratas alcohólicas

Perfil lipídico en el suero de conejos tratados con etanol y dieta hipercolesterolémica / Lipid profile in rabbit serum treated with ethanol and hypercholesterolemic diet

Se pretendió determinar las posibles variaciones del perfil lipídico del suero ante la ingestión de etanol y de una dieta hipercolesterolémica. Se utilizaron 22 conejos machos de 100 d de nacidos, se conformaron 4 grupos: tratados con alcohol, con dieta rica en colesterol, con alcohol y dieta rica en colesterol y un grupo control. El experimento duró 16 semanas. Se les realizó lipidograma a todos los conejos y se analizaron las variables colesterol total, triacilglicéridos, lipoproteínas de alta densidad, lipoproteínas de baja densidad y lipoproteínas de muy baja densidad. Se comprobó que la ingestión crónica de alcohol elevó colesterol total, lipoproteínas de alta densidad, y disminuyó triacilglicéridos y lipoproteínas de muy baja densidad. Los animales tratados con dieta rica en colesterol y los tratados con dieta y alcohol presentaron valores elevados de colesterol total, lipoproteínas de baja densidad, triacilglicéridos y lipoproteínas de muy baja densidad. Los resultados de la presente investigación llevan a la conclusión que el alcohol no ofrece protección antiaterogénica, al menos a las dosis utilizadas en este estudio

Perfil lipídico en el suero de conejos tratados con etanol y dieta hipercolesterolémica / Lipid profile in rabbit serum treated with ethanol and hypercholesterolemic diet

Se pretendió determinar las posibles variaciones del perfil lipídico del suero ante la ingestión de etanol y de una dieta hipercolesterolémica. Se utilizaron 22 conejos machos de 100 d de nacidos, se conformaron 4 grupos: tratados con alcohol, con dieta rica en colesterol, con alcohol y dieta rica en colesterol y un grupo control. El experimento duró 16 semanas. Se les realizó lipidograma a todos los conejos y se analizaron las variables colesterol total, triacilglicéridos, lipoproteínas de alta densidad, lipoproteínas de baja densidad y lipoproteínas de muy baja densidad. Se comprobó que la ingestión crónica de alcohol elevó colesterol total, lipoproteínas de alta densidad, y disminuyó triacilglicéridos y lipoproteínas de muy baja densidad. Los animales tratados con dieta rica en colesterol y los tratados con dieta y alcohol presentaron valores elevados de colesterol total, lipoproteínas de baja densidad, triacilglicéridos y lipoproteínas de muy baja densidad. Los resultados de la presente investigación llevan a la conclusión que el alcohol no ofrece protección antiaterogénica, al menos a las dosis utilizadas en este estudio(AU)

Alteraciones morfométricas de los hepatocitos de ratas albinas que ingieren alcohol desde la adolescencia / Morphometric alterations of the hepatocytes of albinic rats ingesting alcohol since adolescence

Se estudió el hígado, se midieron las variables: área núcleo, área citoplasma, y relación núcleo citoplasma de los hepatocitos de las zonas periportal, intermedia y perivenosa. Se utilizaron 40 ratas de uno y otro sexos, conformándose 2 grupos: alcohólicas y controles. A las alcohólicas se le suministró etanol 40 por ciento diluido en agua desde los 28 hasta los 90 d de nacidas, por vía oral y mediante una cánula intraesofágica. Las variables morfométricas área núcleo y la relación núcleo citoplasma resultaron estadísticamente diferentes y mayores en las ratas alcohólicas(AU)

Efectos del alcoholismo crónico sobre el hígado de ratas albinas adolescentes / Effects of chronic alcoholism on the liver of adolescent albinic rats

Se estudiaron los efectos del alcoholismo crónico sobre el hígado de ratas albinas adolescentes. Se utilizaron 57 ratas de ambos sexos a las que se le suministraron 6 g de etanol por kilogramo de peso corporal diariamente desde los 28 hasta los 90 d de nacidas. Se estudiaron las variables: ganancia en peso corporal, concentraciones en suero de la enzima transaminasa glutámico pirúvica, triacilglicéridos, lipoproteínas de muy baja densidad y las características histológicas del hígado y el glucógeno hepático. Se comprobó que las ratas alcohólicas: ganaron menos peso, presentaron valores significativamente mayores de transaminasa glutámico pirúvica y menores de triacilglicéridos y lipoproteínas de muy baja densidad que los controles. El hígado de las ratas alcohólicas presentó esteatosis intensa, signos de muerte celular por apoptosis y necrosis, infiltrados leucocitarios, cuerpos de Mallory y megalomitocondrias. Los datos encontrados sugieren que las ratas adolescentes son muy sensibles al etanol

Efectos del alcoholismo crónico sobre el hígado de ratas albinas adolescentes / Effects of chronic alcoholism on the liver of adolescent albinic rats

Se estudiaron los efectos del alcoholismo crónico sobre el hígado de ratas albinas adolescentes. Se utilizaron 57 ratas de ambos sexos a las que se le suministraron 6 g de etanol por kilogramo de peso corporal diariamente desde los 28 hasta los 90 d de nacidas. Se estudiaron las variables: ganancia en peso corporal, concentraciones en suero de la enzima transaminasa glutámico pirúvica, triacilglicéridos, lipoproteínas de muy baja densidad y las características histológicas del hígado y el glucógeno hepático. Se comprobó que las ratas alcohólicas: ganaron menos peso, presentaron valores significativamente mayores de transaminasa glutámico pirúvica y menores de triacilglicéridos y lipoproteínas de muy baja densidad que los controles. El hígado de las ratas alcohólicas presentó esteatosis intensa, signos de muerte celular por apoptosis y necrosis, infiltrados leucocitarios, cuerpos de Mallory y megalomitocondrias. Los datos encontrados sugieren que las ratas adolescentes son muy sensibles al etanol(AU)